DAPI染色液

簡要描述：產品概述 product description 貝博® BBcellProbe® DAPI染色試劑用于普通的細胞核染色以及某些特定情況下的雙鏈DNA染色，染色后可用熒光顯微鏡檢測或流式細胞儀檢測。DAPI (diamidino-2-phenylindole) 能與雙鏈DNA小槽，特別是AT堿基結合，也可插入少于3個連續(xù)AT堿基對的DNA序列中。當它與雙鏈DNA結合時，熒光強度增強20倍，而與單鏈DNA結合則無熒光增強現象，因此是一種簡易、快速和敏感地檢測DNA的方法。 DAPI的熒光強度較Hoechst低，但熒光穩(wěn)定性優(yōu)于Hoechst；其特異性較溴化乙啶和碘化丙啶高。

產品型號：
廠商性質：生產廠家
更新時間：2024-11-23
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詳細介紹

保存溫度

2-8℃ 避光

注意事項

1.長期不用可以-20℃保存。
2.染色液避免反復凍融。
3.試劑拆封后請盡快使用完！

有效期

六個月

檢測方法

流式細胞儀/熒光顯微鏡/激光共聚焦

適用樣本

動物細胞

產品應用

流式細胞儀/熒光顯微鏡/激光共聚焦

儀器準備

1.熒光顯微鏡/激光共聚焦
2.離心機
3.移液器
4.冰箱
5.冰盒

試劑準備

1.PBS緩沖液 2.HBSS

耗材準備

1.離心管
2.吸頭
3.一次性手套

使用注意事項

1.螺旋蓋微量試劑管裝的試劑在開蓋前請短暫離心，將蓋內壁上的液體收集至管底，避免開蓋時液體灑落。
2.細胞處理需要小心操作,盡量避免人為的損傷細胞。
3.染色后立即進行分析。
4.染色時間根據不同樣本的實際染色結果做相應調整。
5.本染色液可用于培養(yǎng)細胞、細胞涂片、石蠟切片、冰凍切片的檢測。石蠟切片用常規(guī)方法脫蠟、分化、冰凍切片用冰丙酮固定后檢測。
6.根據樣本情況和下游的檢測儀器選擇合適的染色方法，只要在染色時染色工作液能充分覆蓋細胞樣本即可。
7.活細胞原位染色可能需要較長時間，可將染液加入培養(yǎng)基后避光孵育1-4小時，或更長時間。
8.以下以培養(yǎng)細胞的涂片的熒光顯微鏡檢測為例，細胞染色不需要固定，也可以固定后染色，其他方法請參閱相關資料。

使用方法

1. 染色工作液的配制：
根據樣品數用PBS將DAPI染色液10-100倍稀釋，配制成染色工作液。
2. 細胞涂片的制備：
貼壁細胞，可將蓋玻片放于培養(yǎng)器皿中，讓培養(yǎng)細胞長于玻片上，然后用藥物誘導細胞凋亡后取出，用4%多聚甲醛固定5min。也可其他方式培養(yǎng)后收集細胞制作涂片檢測。
對于懸浮細胞，用藥物誘導細胞凋亡后，500-1000g離心5分鐘收集細胞，用PBS洗2次，收集調整細胞數為1X105/ml，涂片或用離心涂片，用4%多聚甲醛固定5min；
3. 用PBS洗滌涂片兩次。
4. 加適量染色工作液于涂片上，室溫避光染色5-20分鐘。
5. 用熒光顯微鏡檢測結果。染料-DNA復合物的激發(fā)波長為360nm，發(fā)射波長為454nm。

結果分析：
置于熒光顯微鏡下用360nm激發(fā)光觀察結果：DAPI染色呈藍白色熒光。
早期凋亡細胞呈現核濃縮，染色加深，或核染色質呈新月形聚集于核膜一邊；晚期凋亡細胞表現為核碎裂成大小不等的圓形小體，并被細胞膜所包繞，即凋亡小體。

參考文獻

1.Xiaojun Zhou, et al.
BMP-2 Derived Peptide and Dexamethasone Incorporated Mesoporous Silica Nanoparticles for Enhanced Osteogenic Differentiation of Bone Mesenchymal Stem Cells
ACS Applied Materials & Interfaces 2015 （IF=8.097）

2.Siqin Huang, et al.
Protective Effect of Electroacupuncture on Neural Myelin Sheaths is Mediated via Promotion of Oligodendrocyte Proliferation and Inhibition of Oligodendrocyte Death After Compressed Spinal Cord Injury
Molecular Neurobiology 2015 （IF=5.397）

3.Wei Feng, et al.
Polyelectrolyte multilayer functionalized mesoporous silica nanoparticles for pH-responsive drug delivery: layer thickness-dependent release profiles and biocompatibility
Journal of Materials Chemistry 2013 （IF=6.101）

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